1、定义
是指在执行实验过程中，防止一切微生物侵入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法；
无菌操作技术是微生物实验的基本技术，是保证微生物实验准确和顺利完成的重要环节。
2、内容
无菌操作技术主要包括两方面：
1）创造无菌的培养环境。包括提供密闭的培养容器、培养容器的灭菌、培养基的灭菌等；
2）在操作和培养过程中防止一切其它微生物的侵入的措施。包括紫外线杀菌、甲醛熏蒸、超净台的消毒与检测、操作工具、器皿灭菌、操作方法等。
3、无菌操作原则
1）在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区，接种时必须穿工作服、戴工作帽，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75%酒精棉球将手擦干净；
2）在操作前20～30分钟要先启动超净台和紫外灯，进行接种所用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼3次后使用。严禁用手直接拿无菌物品，如瓶塞等，而必须用消毒的钳、镊子等；
1、无菌室
（1）无菌室的结构：更衣间、缓冲间、操作间；
（2）无菌室的消毒和防污染
每日（使用前）紫外线照射（0.5~1小时）；
每月用新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒；
每季度用甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸（2小时），特殊情况下可增加熏蒸频次。
（3）无菌室使用要求
2、超净工作台
超净台的使用与保养：
（1）风速稳定，且符合要求；
（2）使用前开启紫外灯照射30分钟以上；
（3）让超净台预工作10－15分钟；
（4）使用完毕后，用70%酒精将台面和台内四周擦拭干净。
3、无菌器材
（1）灭菌器材：玻璃器皿、培养基、无菌衣等；
（2）消毒器材：无菌室内的凳子、试管架、天平、工作台、手等。
（3）无菌间一般只允许放置无菌操作台、转椅等物品；无菌操作台上一般只允许摆放以下物品： 酒精灯、打火机、接种针、消毒棉球、洗耳球、镊子、油性笔、灭菌平皿、试管架、灭菌吸管、电子天平、250ml灭菌三角瓶、培养基、均质器等。
