在人脐带间充质干细胞培养时会经常用到干细胞的冻存与复苏，详细步骤如下：
1.使用胰酶对已经冻存的细胞进行消化处理，并记录相应数据；
2.室温、离心力200g，离心5min，后去除上清；
3.根据细胞的数量情况加入适量的冻存液，控制细胞浓度在1×106~5×106；
4.将已经摇匀的重悬细胞等份加入已经灭菌的冻存管中，封紧瓶盖；
5.把已经封好的冻存管置入冻存盒中，放入-80摄氏度存放；
6.24小时后把-80摄氏度的细胞取出转移到液氮中存放；
7.使用37摄氏度水浴预热人脐带间充质干细胞培养基；
8.将存放于液氮或冰盒中的人脐带间充质干细胞取出并迅速置入37摄氏度水浴快速解冻（半冰半水即可）；
9.在超净台中加入30ml的人脐带间充质干细胞培养基重悬细胞，转移到T-150 细胞培养瓶中；
10.将得到的培养瓶培养于无菌、37摄氏度、5%CO2的培养箱中；
11.培养24小时后，用新鲜的人脐带间充质干细胞培养基给细胞换液。
